橘核質量的測評實驗報告

1儀器與試藥

1.1儀器

天美LC2000型高效液相色譜儀（LC2030檢測器、LC2130泵、L-2200自動進樣器），T2000P色譜工作站；BP211D型電子分析天平（德國sartorius 公司），LK-400藥用粉碎機（浙江城關紅利數控制造廠）。

1.2試藥

橙皮苷對照品（批號：110721-200613，供含量測定用）購自中國藥品生物製品檢定所；橘核藥材分別購自廣東康美藥業（1）、廣州致信藥業（2）及廣州市採芝林連鎖藥店（3），經廣州中醫藥大學中藥學院陳康教授鑑定皆爲橘Citri Reticulatae Blanco的乾燥種子；流動相所用甲醇爲色譜純，水爲雙蒸水，其他試劑均爲分析純。

2方法與結果

2.1色譜條件與系統適用性

色譜柱：安譜公司Kromasil C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-36%（體積分數）乙酸-水（體積比38∶2∶60）；流速：1.0 mL·min-1;檢測波長：285 nm;柱溫：25 ℃。分別精密吸取對照品、供試品溶液各10 μL注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，見圖1。

2.2線性關係考察

精密吸取“2.1.1”項下對照品溶液 0.5、1、2.5、5、7.5、10 mL，分別置10 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取10 μL進樣。按“2.2”項下色譜條件進行測定，測定峯面積。以峯面積積分值（Y）爲縱座標，橙皮苷對照品進樣量（X）爲橫座標進行線性迴歸，得迴歸方程爲：Y=2×106X-1?4823×104，r=0.999 9。結果表明，橙皮苷在0?103～2.060 μg之間線性關係良好。[PSd201;S*2〗A.橙皮苷對照品； B.橘核供試品圖1 橘核HPLC圖Figure 1HPLC chromatograms

2.3精密度試驗

精密吸取橙皮苷對照品溶液（0.206 mg·mL-1）10 μL，注入液相色譜儀，重複進樣6次，測定橙皮苷色譜峯峯面積，RSD爲1.82%（n=6），表明儀器精密度良好。取第3批的橘核樣品6份，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液，分別進樣10 μL，測定橙皮苷峯面積，計算含量，其RSD爲2.50%（n=6），表明該方法重複性良好。取同一份供試品溶液（第3批），分別在0、3、6、12、18、24 h精密吸取10 μL，注入液相色譜儀，測定橙皮苷峯面積，計算含量，其RSD爲1.76%，表明供試品溶液在24 h內穩定性良好。取已知橙皮苷質量的樣品（第1批）6份，每份取約1 g，精密稱定。分別準確加入質量濃度爲0?206 mg·mL-1的橙皮苷對照品溶液1 mL，混合後揮幹甲醇。按“2.1.2”項下方法制備回收率供試樣品溶液，依法進行測定，計算回收率。結果見表1。表1回收率試驗結果

3結果

橘核爲種子類藥材，富含脂肪油。試驗對脫脂後甲醇提取樣品溶液和不經脫脂直接用甲醇提取的'樣品溶液進行了比較研究，結果發現未經脫脂而直接提取的樣品干擾成分較多，峯形較差。此外，樣品中的脂肪油對柱體污染性較強，所以製備樣品溶液時應該先以石油醚脫脂，再以甲醇提取。試驗對常用的流動相系統如甲醇-水、乙腈-水、甲醇-酸水及各系統組分不同比例間進行了比較，結果表明採用甲醇-36%（體積分數）乙酸-水（體積比38∶2∶60）進行洗脫效果爲佳。在該條件下橙皮苷分離度良好，峯形窄而對稱，且不受其他峯的干擾。