催吐蘿芙木脂溶性生物鹼提取工藝研究

　　1、材料

催吐蘿芙木幹根（海南省五指山市海南製藥廠提供）。冰醋酸、醋酸酐、高氯酸、硫酸銀、氯化鋇、雷氏銨鹽等均爲分析純，95%的酒精爲工業級。

BT244S型電子天平（德國Sartorius）；RE-52-CS型旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）；DZF-6020型真空乾燥箱（上海博迅實業有限公司）。

　　2、方法與結果

2.1 蘿芙木生物鹼的提取催吐蘿芙木幹根經粉碎，過40目篩後真空乾燥。考慮到不破壞蘿芙木提取物的生物活性，本實驗在溫水浴條件下采用工業酒精浸漬法。提取液經減壓濃縮，回收乙醇得浸膏。

2.2 水溶性生物鹼含量的測定雷氏銨鹽在酸性介質中可與大部分的生物鹼生成沉澱。因此本試驗將提取物用稀酸水溶解並調pH=2，加入新鮮配製的雷氏銨鹽飽和水溶液，濾出生成的生物鹼雷氏鹽沉澱，用少量冰水洗滌1～2次，抽乾。將沉澱溶於丙酮，濾除不溶物，再向生物鹼雷氏鹽丙酮溶液中加入硫酸銀飽和水溶液，使生物鹼雷氏鹽分解，生成生物鹼硫酸鹽和雷氏銀鹽沉澱，過濾後再向濾液中加入計算量的氯化鋇溶液，生成生物鹼鹽酸鹽和硫酸鋇沉澱，過濾，濾液蒸乾得生物鹼鹽酸鹽，稱重。蘿芙木生物鹼的.藥用形式多爲水溶性鹽［7］，因此本實驗以沉澱法得到的鹽酸鹽的量作爲提取物中水溶性生物鹼的量。

2.3 統計分析採用SAS（STATISTICAL ANALYSIS SYSTEM）8.0統計軟件進行數據處理，以GLM過程做總模型方差分析，從而選擇較優提取條件。

2.4 提取條件的優選 稱取催吐蘿芙木粗粉20 g，根據影響溶劑提取的主要因素，選擇溶劑用量（A）、提取時間（B）、提取溶液的pH條件（D）作爲考察因素，每個因素根據實際情況取3個水平，按L9（34）表進行正交實驗，分別按“2.1項”下所述方法制得浸膏。以提取物中的生物鹼鹽酸鹽爲指標，採用SAS 8.0統計軟件進行統計分析。正交實驗表頭設計見表1，實驗結果及處理數據見表2～3。

正交實驗結果經方差分析，各提取因素對提取效果均有顯着影響，其中pH條件影響較顯着，提取時間和溶劑用量次之。分別對各因素不同水平做差異顯着性分析，可知A2與A3，C2與C3皆無顯着性差異，其餘兩兩之間差異顯着。根據正交實驗結果，結合大生產可能性，並從降低成本角度考慮，最終確定提取工藝爲A2B1D1，即藥材粉碎成細粉，加10倍量95%的工業酒精在pH爲2的條件下，浸提5 h。經過濾，濃縮，回收乙醇，製得浸膏。

2.5 最佳工藝條件的驗證以正交實驗的最佳工藝參數進行驗證試驗，結果如表4。可知，應用優化後的工藝進行提取試驗，每100 g生藥提取後能製得12.8 g水溶性生物鹼鹽酸鹽。3次所得提取物中生物鹼鹽酸鹽的量基本平行，說明此工藝條件重複性好。傳統的醇提工藝大多直接以工業酒精浸漬3～7 d，優化後的提取工藝只需5 h，生物鹼鹽酸鹽的提取率可達12.8%。

　　3、結果

催吐蘿芙木中的脂溶性生物鹼進行了大量研究，發現了一系列的單萜吲哚類生物鹼［2～5］。催吐蘿芙木原產於西非加納，是蘿芙木中的優良品種，其乾燥根及莖是我國重要的南藥，具有清風熱、降肝火、消腫解毒的作用，是降壓藥利血平的主要天然來源［6］。正交實驗結果表明，提取溶劑的pH條件對提取水溶性生物鹼影響最大，提取時間次之，溶劑用量影響最小。在A3B1D1條件下，溶劑用量稍大，成本過高，故選擇A2B1D1爲最佳提取工藝條件。

本實驗旨在優化水溶性生物鹼的提取工藝，首次採用雷氏銨鹽沉澱法從催吐蘿芙木浸膏中獲得生物鹼鹽酸鹽。由於蘿芙木生物鹼的藥用形式多爲水溶性鹽，因此以沉澱法得到的鹽酸鹽作爲考察指標，具有一定的現實意義。傳統的醇提工藝大多直接以工業酒精浸漬3～7 d，而在本工藝條件下，通過調節工業酒精的pH值，加入酸作爲浸提輔助劑，提高了浸提效能，大大地縮短了浸提時間。