檢測生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質
實驗原理:
還原糖 磚紅色
脂肪 紅色
蛋白質 紫色
1、還原糖的檢測
什麼是還原性糖:
還原性糖:有還原性基團——遊離醛基或酮基的糖;如葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、半乳糖。
非還原性糖:澱粉、纖維素、蔗糖、糖元。
(1)材料的選取:還原糖含量高,白色或近於白色,如蘋果,梨,白蘿蔔。
(2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),現配現用。
(3)步驟:取樣液2mL於試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻後再加入)→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化(淺藍色→棕色→磚紅色)
2、脂肪的檢測
(1)材料的選取:含脂肪量越高的組織越好,如花生的'子葉。
(2)步驟:製作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央
↓
染色(滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min後吸去染液→滴體積分數50%的酒精洗去浮色→吸去多餘的酒精)
↓
製作裝片(滴1~2滴清水於材料切片上→蓋上蓋玻片)
↓
鏡檢鑑定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)
3、蛋白質的檢測
(1)試劑:雙縮脲試劑(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步驟:試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻→觀察顏色變化(紫色)
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