雞骨草不同部位化學成分分析
雞骨草含揮發油、三萜類、氨基酸、黃酮、皁苷、多糖類等化學成分;雞骨草根、莖中一些化學成分構成和含量上均存在差異,其中在含量上,黃酮類以莖部多於根部,皁苷和多糖類均以根部多於莖部;綜合以上分析可以看出,運用FTIR技術可以快速鑑別出雞骨草所含有的化學成分以及其藥材不同部位所含化學成分的差異,與一般方法相比具有無需要提取分離,並可以同時測定多種化學成分含量等優點,不破壞雞骨草的原本性,可以從宏觀上整體把握藥材的質量。
1、儀器與材料
1.1 儀器傅里葉紅外光譜儀(Nicolet 5700,DTGS/B檢測器)。
1.2 樣品來源雞骨草藥材於2007-10採自在廣西大學農學院教學科研基地(2006年種植),經廣西大學農學院黃榮韶教授鑑定爲豆科相思子屬植物雞骨草oniensis。
2、方法
2.1 樣品製備樣品在55℃乾燥48 h,粉碎過200目,每個樣品作3個重複,各樣品稱1.0 mg與溴化鉀(碎晶)混合研磨充分均勻,壓片成厚度約1 mm的錠片,將錠片放入紅外光譜儀測定,每個片隨機掃3個不同的點,再取其平均譜圖作爲最後的樣品譜圖。
2.2 測試條件光譜範圍4 000~400 cm-1;光譜分辨率4 cm-1;掃描次數64次。
3、結果
3.1 雞骨草全株紅外光譜特徵分析依據雞骨草的化學成分特徵,可以將雞骨草的紅外吸收光譜(圖1~2)分爲3個波段,第1波段:3 500~2 800 cm-1,中心位置在3 403.7 cm-1的.寬帶振動主要是-OH伸縮振動峯和氨基酸中N-H鍵伸縮振動的疊加,2 923 cm-1和2 858cm-1兩個峯分別是-CH2的對稱和反對稱伸縮振動峯。此波段可以認爲是揮發油類、蛋白質和核酸等物質對光譜的貢獻[11];第2波段:1 800~1 240 cm-1,應歸屬爲α,β-不飽和酯鍵、C=C或芳環骨架振動的疊加峯[12]。在1 735 cm-1是酯羰基的伸縮振動峯,1 639 cm-1是C=C或芳環骨架振動的疊加峯,1 375 cm-1和1 247 cm-1附近是三萜類骨架振動[13]。可見此波段主要是酯類、黃酮類和萜類物質的特徵吸收。第3波段:1 200~1 000 cm-1,主要爲糖苷或多糖類物質的特徵吸收,1 153 cm-1附近爲皁苷類的C-O基團的特徵吸收。1 029 cm-1附近吸收峯最爲強烈,是糖苷類物質的υC-O(H)伸縮振動 [12~14]。綜上所述,雞骨草主要含有揮發油、酯類、三萜類、氨基酸、黃酮、皁苷、多糖類化學成分,這跟前人研究結果一致[2]。
3.2 雞骨草不同部位紅外光譜比較分析圖3~4是雞骨草不同部位的一維和二階導數紅外譜圖。因爲收穫時雞骨草極易落葉,所以本文只作根和莖的比較。圖3顯示,在1 700~500 cm-1範圍內根和莖的峯位和峯強無明顯差別,以根的譜圖爲參照對象,計算出根和莖的紅外譜的相關係數爲0.991 4,表明雞骨草根和莖中化學成分變化不大。二階導數圖譜的相關係數爲0.9687。 但是從一維紅外譜和二階導數圖譜上仍然可以看出雞骨草根和莖存在的差異,例如:圖3-1在1 241 cm-1處出現吸收峯,而在圖3-2中此峯出現在1 261 cm-1處,相差20 個波數;圖3-1在860,669 cm-1出現吸收峯,而在圖3-2卻沒有出現;在1 760~1 710 cm-1區域內圖4-1′ 只在1 754 cm-1附近有吸收峯,而圖4-2′ 在1 757 cm-1和1 733 cm-1附近都有吸收峯;圖4-1′在1 082 cm-1和1 069 cm-1有兩個吸收峯,一強一弱,而圖4-2′ 在此波段只出現單峯。由此表明雞骨草不同部位化學成分組分可能存在差異。
3.3 雞骨草不同部位化成分半定量分析試驗中均取1 mg樣品製片,分別測得雞骨草根和莖在1 737,1 641,1 152,1 025 cm-1等處吸收峯的峯強,並計算出相應波數處的Aroot/Astem值列入表1中,可以推測出雞骨草黃酮類根部<莖部,而皁苷和多糖類含量根部>莖部。
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