畢業生疾控中心實習目的

一、實習目的

實習是學生大學學習很重要的實踐環節。實習是每一個大學生的必修課，它不僅讓我們學到很多在課堂上根本就學不到的知識，還能使我們開闊視野，增長見識，爲我們以後更好把所學的知識運用到實際工作中打下堅實的基礎。

這次有機會能夠到疾控中心實習，我感到很慶幸。雖然只有兩週的時間，但是在幾位老師的幫助下，我對於微生物基礎知識有了更加深層次的理解，增加了對微生物知識的感性認識，鍛鍊和提高了獨立分析和解決實際問題的能力。與老師相處了兩週，老師很熱心和真誠，盡心盡力的將實驗操作的技能和要點傳授給我，爲人很和善，包容我的錯誤，讓我有了很大的進步。

二、實習內容

第一天在老師的帶我們去單位瞭解一下環境和認識一下老師。到達後李老師負責我們這次實習的全過程，她將實習過程的注意事項和規章制度，並且瞭解各個實驗室裏面的大型儀器。

老師告誡我們到實習單位後一定要跟帶領我們的老師的作息時間一致，不可以早退，不能偷懶，一定要把實驗室的衛生搞好。我們即將進入社會，在如何與人相處，處理好人際交往進行鍛鍊和提升，聽到老師的一席話，我受益匪淺，暗暗下決心，一定要好好的實習和學習，不給學校丟臉。

這次實習，由於老師們正在進行的前期實驗都已完成，所以我們在這段時間主要進行《食品安全國家標準----菌落總數測定》的培訓。

開始時自己就是跟在實習老師的後面打打下手，幫忙拿溶劑，洗瓶子，稱量等。在實習老師的指導帶領下，我對實驗室分析的內容慢慢的有了很深的瞭解，自己在一個多星期的學習下也能獨立完成一些簡單實驗。

主要實驗是菌落總數的'檢驗，程序如下：

樣品的稀釋

固體和半固體樣品：稱取25 g樣品置盛有225 mL磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌均質杯內，8000 r/min～10000 r/min均質1 min～2 min，或放入盛有225 mL稀釋液的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1 min～2 min，製成1:10的樣品勻液。

液體樣品：以無菌吸管吸取25 mL樣品置盛有225 mL磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)中，充分混勻，製成1:10的樣品勻液。

用1 mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1 mL，沿管壁緩慢注於盛有9 mL稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液麪)，振搖試管或換用1支無菌吸管反覆吹打使其混合均勻，製成1:100的樣品勻液。

按1.3操作程序，製備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1次1 mL無菌吸管或吸頭。

根據對樣品污染狀況的估計，選擇2個～3個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)，在進行10倍遞增稀釋時，吸取1 mL樣品勻液於無菌平皿內，每個稀釋度做兩個平皿。同時，分別吸取1 mL空白稀釋液加入兩個無菌平皿內作空白對照。

及時將15 mL～20 mL冷卻至46 ℃的平板計數瓊脂培養基(可放置於46 ℃±1 ℃恆溫水浴箱中保溫)傾注平皿，並轉動平皿使其混合均勻。

培養

待瓊脂凝固後，將平板翻轉，36 ℃±1 ℃培養48 h±2 h。水產品30 ℃±1 ℃培養72 h±3 h。6.2.2 如果樣品中可能含有在瓊脂培養基表面瀰漫生長的菌落時，可在凝固後的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養基(約4 mL)，凝固後翻轉平板，按6.2.1條件進行培養。

菌落計數

可用肉眼觀察，必要時用放大鏡或菌落計數器，記錄稀釋倍數和相應的菌落數量。菌落計數以菌落形成單位(colony-forming units，CFU)表示。

選取菌落數在30 CFU～300 CFU之間、無蔓延菌落生長的平板計數菌落總數。低於30 CFU的平板記錄具體菌落數，大於300 CFU的可記錄爲多不可計。每個稀釋度的菌落數應採用兩個平板的平均數。

其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜採用，而應以無片狀菌落生長的平板作爲該稀釋度的菌落數;若片狀菌落不到平板的一半，而其餘一半中菌落分佈又很均勻，即可計算半個平板後乘以2，代表一個平板菌落數。

當平板上出現菌落間無明顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作爲一個菌落計數。